PC-LINK光裂解實驗成功關鍵

PC-LINK光裂解實驗是一種利用光敏基團在DNA探針中實現光控斷裂的技術。以下是該實驗的關鍵步驟和原理：

 1. DNA探針設計

- 光敏基團引入：在DNA探針的特定位置嵌入光敏基團（如PC-LINK），這些基團在光照下會發生斷裂。

- 探針功能：探針通常包含目標識別序列和報告基團（如熒光標記）。

2. 實驗步驟

- 雜交：將DNA探針與目標DNA或RNA雜交。

- 光照：用特定波長的光照射，激活光敏基團，導致探針在特定位置斷裂。

- 檢測：通過熒光或其他方法檢測斷裂產物，分析目標序列。

3. 應用

- 基因檢測：用于檢測特定基因序列。

- 分子生物學研究：研究DNA/RNA的相互作用和結構。

- 光控技術：實現光控的基因表達調控或分子開關。

 4.優點

-高特異性：光敏基團僅在光照下斷裂，減少非特異性反應。

- 時空控制：通過光照實現精確的時空控制。

 5. 注意事項

- 光敏基團選擇：需選擇合適的光敏基團和波長。

- 實驗條件優化：需優化光照時間和強度。

總結：PC-LINK光裂解實驗通過光敏基團實現DNA探針的光控斷裂，具有高特異性和時空控制能力，適用于基因檢測和分子生物學研究。

在PC-LINK光裂解連接步驟中，準確測量紫外燈的功率是確保實驗成功的關鍵。以下是詳細的步驟和方法：

使用紫外線輻照計

1.準備工作：

. 選擇一款適合測量365nm波長的紫外線輻照計。

. 確保輻照計在使用前已經過校準，通常每年校準一次，這里可以現在有測試設備的廠家，這樣可以不用額外采購輻照計(上海路陽/LUYOR品牌的提供測試，并且可以每年返廠免費測試一次）廠家提供測試可以忽略下面的步驟。

2.測量步驟：

. 打開紫外燈，等待5分鐘直至其穩定。

. 將輻照計的光蓋打開，置于紫外燈中央下方垂直1米處。

. 讀取并記錄輻照計上的數值，該數值即為紫外燈的功率（通常以μW/cm2為單位）。

使用紫外線強度指示卡

1.準備工作：

. 獲取適用于365nm波長的紫外線強度指示卡。

. 確保指示卡在使用前未過期，并妥善保存。

2. .測量步驟：

. 打開紫外燈，等待5分鐘直至其穩定。

. 將指示卡置于紫外燈中央下方垂直1米處，有圖案的一面朝向燈管。

. 照射1分鐘后，立即將指示卡與標準色塊進行比較。

. 根據顏色變化確定紫外燈的輻照強度是否達到要求（新燈管≥90μW/cm2，舊燈管≥70μW/cm2）。

注意事項

· 定期校準：確保輻照計的準確性，定期進行校準。

· 環境條件：測量時應確保環境清潔，避免灰塵和油污影響測量結果。

· 安全防護：操作紫外燈時，務必佩戴防護眼鏡和手套，避免直接暴露于紫外光下。