符合FDA法規(guī)要求的防曬劑HPLC 分析方法

簡介：長時間暴露在來自太陽或者日 曬機器床的紫外線（UV）輻射 下，會對皮膚細胞的 DNA 造成 傷害，引起基因突變，從而導(dǎo)致皮膚癌，在美國每年有 350 萬這樣的病例，大約 11500 人死亡。UV 分為三種：UVC、 UVB 和 UVA。在這三者中，UVC 的波長最短，也是最危險的。幸運的是，UVC 被大 氣中的臭氧層吸收。UVB 的波長較短，能夠穿透皮膚的外層。UVA 波長較長，能 夠穿透進入深層皮膚，從而引起皮膚曬斑和過早老化，這兩種類型的 UV 都能夠引起皮 膚基因突變，從而導(dǎo)致皮膚癌。

可以通過避免長時間暴露在 UV 光源下，或者在皮膚暴 露于 UV 光源之前或過程中使用防曬霜的方法來防止皮 膚癌。防曬霜之所以能夠保護皮膚，是由于其中包含一 些化合物，這些化合物可以化學(xué)吸附或者物理方式阻隔 UVA 和 UVB。2012 年夏天，美國出臺了新的法規(guī)，闡 明了防曬霜的生產(chǎn)企業(yè)使用“broad spectrum”的術(shù)語。 新法規(guī)規(guī)定，只有防曬指數(shù)（SPF）值不少于 15,提供充 分的 UVA/UVB 防護的防曬產(chǎn)品，才能在其標簽上標明 “broad spectrum”。SPF15 是指，假設(shè) UV 的強度固 定，使用防曬產(chǎn)品來防護 UVB，使用者暴露于 UV 下不 被灼傷的時間比未使用防曬產(chǎn)品者不被灼傷的時間長 15 倍。

本應(yīng)用文獻提供了同時分析五種常用防曬劑的方法，從 而幫助確保防曬產(chǎn)品具有足夠防曬級別，安全性，并且 符合新法規(guī)要求。本應(yīng)用文獻對標稱 SPF30, 50 和 100  的三種防曬霜進行了分析，測定了其中各種防曬劑類化 合物的含量。

試驗 分別稱取一定量的純物質(zhì)于 20 mL 的容量瓶中，制備 5 mg/mL 的歐托奎雷、辛水楊酯、甲基水楊醇和 2 mg/mL 的阿伏苯宗及二甲苯酮的儲備液。首先加入 10mL 異丙 醇，渦旋 1 min，，然后超聲 10 min。冷卻至室溫，乙腈 定容至刻度。移取標準儲備溶液 0.5 mL 于 10 mL 的容 量瓶中，乙腈定容至刻度，制備工作標準溶液。工作標 準溶液連續(xù)六次進樣計算重復(fù)性。

防曬乳液樣品制備：分別稱取 0.5 g 30 SPF、50 SPF、 100 SPF 的防曬乳液樣品置于三個 10 mL 的容量瓶中，加入 5 mL 異丙醇，渦旋 1 min 后，超聲 10 min，待溶液冷卻至室溫，乙 腈定容至刻度。樣品溶液 5000 RPM 離心 10 min，分別移取 30 SPF，50 SPF，100 SPF 樣品上層溶液 3 mL、2 mL、1.5 mL 于不同的 50 mL 容量瓶中，乙腈定容至刻度。進樣之前， 樣品經(jīng) 0.2 μm 的尼龍膜過濾。

結(jié)果與討論 本文獻使用珀金埃爾默 Brownlee™ C-18 分析色譜柱進行分 離，5 μm，150 x 4.6 mm。運行時間約 8 min，最佳的流速為 1.2 mL/min，且壓力適當(dāng)，背壓為 2000 psi（138 bar）。所有 被分析的五個化合物得到了很好的分離。重復(fù)性結(jié)果良好， RSD%范圍為 0.7-1.0。根據(jù)三種防曬霜的標稱值計算，30 SPF，50 SPF，100 SPF 的回收率分別為 83%，78%和 85%。 工作溶液的色譜圖見圖 1 所示，30 SPF，100 SPF 三個樣品 的色譜圖分別見圖 2，3。方法性能和防曬霜樣品測定結(jié)果見 表 2 所示。不同防曬劑最大允許量如表 3 所示。

結(jié)論 在世界范圍內(nèi)，皮膚癌的發(fā)病率持續(xù)增加，達到了流行 病的程度。使用防曬霜來防止該類疾病持續(xù)增長，由此 防曬霜的功效和安全越來越被關(guān)注。本應(yīng)用文獻提供了 6 min 內(nèi)完成五種主要防曬劑的分析方法。方法性能突 出，精密度的范圍為 0.7 %-1.2 % RSD。防曬霜中該五 種防曬劑化合物分析結(jié)果在美國，英國，日本和巴西規(guī) 定的最大允許含量范圍之內(nèi)。該分析利用可靠的 PerkinElmer’s FX 15 系統(tǒng)，使用 Agilent’s® EZChrom  Elite™色譜數(shù)據(jù)系統(tǒng)進行控制來完成。