【高斯摩分享】什么是制備型 HPLC？

制備型HPLC是可以分離和收集組分的高效液相色譜（ HPLC ）。

通過對主要成分進行精制可以提高純度，并且可以收集樣品中所含的雜質等微量成分。制備型HPLC的原理與普通HPLC分析相同，因此通過選擇合適的色譜柱，可以根據化合物的各種特征，如化學結構、分子量和3D結構來分離和純化各個組分。

此外，通過改變色譜柱尺寸和設備配置，制備型 HPLC 可以將獲得的目標產物的量從毫克級改變到公斤級。

制備型 HPLC 的應用

1.化學合成后目標成分的純化

制備型HPLC的一個特點是它可以利用HPLC的高分離能力。如果您可以在 HPLC 上獲得分離的峰，則可以單獨分離每個峰。

在有機化學、生物化學等領域，通過化學合成或生物催化劑合成獲得的樣品除主要成分外，還含有雜質、副產物等多種微量成分。使用柱純化和重結晶等常規純化方法很難選擇性地僅提取一種成分。另一方面，對于制備型HPLC，如果可以進行HPLC分離，則分離的可能性很高。

2. 通過主成分和雜質的制備分離進行副反應分析

在制備型HPLC中，通過HPLC分離的每個峰都可以作為單獨的級分收集，因此可以選擇性地收集高純度的主要成分和雜質。例如，在材料行業中，高純度樣品用于利用制備型HPLC獲得的高純度目標物質來評估材料和物理性質。

此外，在化學工業中，通過高純度雜質和副產物的結構分析來分析反應系統中發生的副反應。

3. 蛋白質和聚合物的純化

在生物系統中，制備型 HPLC 通過尺寸排阻色譜 (SEC) 柱進行蛋白質純化。在聚合物領域，我們使用SEC柱來純化聚合物，進行分子量分級，并評估各組分的物理性能。

4.天然產物的純化

HPLC 的高分離能力有時用于從含有各種化合物的天然產物樣品中提取目標物質。反相柱因其高分離能力而經常被使用。

制備型高效液相色譜法原理

制備型 HPLC 的分離機理與分析型 HPLC 類似。與常規柱純化和重結晶等其他純化方法不同，制備型 HPLC 的優勢在于它可以以與分析幾乎相同的分離能力進行純化。

HPLC柱填充有多孔硅膠或表面經過烷基等官能團修飾的硅膠。填充的材料稱為固定相， 常用的是十八烷基（ODS，C18）基團修飾的硅膠。當樣品溶液注入柱中時，樣品的每種成分與固定相相互作用或分配到固定相中。

這種相互作用的強度或分配程度取決于每種組分的物理化學性質，因此每種組分在通過色譜柱時會分離。 HPLC的原理就是通過這種方式分離各個組分。