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            上新 | 蛋白酶K滅活太麻煩?熱敏版55℃ 10分鐘搞定!

            來源:翌圣生物科技(上海)股份有限公司   2025年05月28日 08:27  

            在分子生物學研究領域,蛋白酶K憑借的蛋白降解性能,始終是核酸提取與樣本裂解等核心實驗步驟的關鍵工具。其通過高效裂解細胞并降解蛋白質,為核酸的快速釋放與純化奠定基礎。然而,傳統蛋白酶K在實際應用中暴露出顯著的技術瓶頸:滅活過程復雜且風險高。無論是采用苯酚/氯仿抽提的多步驟純化流程,還是高溫處理引發的樣本降解風險,都可能導致實驗周期延長、結果重現性降低,進而影響后續數據分析的準確性與可靠性。





            為突破這一技術壁壘,翌圣生物成功研發并推出熱敏蛋白酶K(Thermolabile Proteinase K,Cat#14809)產品,該產品只需在55℃條件下加熱10分鐘即可實現滅活,無需額外的核酸純化步驟,有效避免了酶殘留對下游實驗的干擾。例如:Thermolabile Proteinase K應用于直擴PCR、DNA&RNA建庫等實驗中,可省略多次純化流程,有效降低核酸損耗,提升樣本利用率;應用于甲基化DNA分析過程中,通過精準控制酶解條件,避免因過度消化導致的甲基化位點破壞,確保實驗結果的準確性與可靠性。

            產品簡介

            Thermolabile Proteinase K

            Thermolabile Proteinase K(TLPK)是通過基因工程技術改造獲得的重組絲氨酸蛋白酶,保持了與野生型版本相似的活性和特異性,具備廣泛的切割活性,能夠高效水解多種類型的肽鍵。在理化性質方面,TLPK展現出良好的緩沖液兼容性,可在多種緩沖體系中保持活性。其最適反應條件為pH 7.0-9.5、溫度20-40℃,在此區間內能夠發揮最佳效能。該酶具備優異的熱敏感性,只需在55℃條件下溫育10分鐘即可全熱失活。

            表1. 普通款和熱敏款蛋白酶K特點比較

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            在此,我們向您推介翌圣生物全新研發的來源于畢赤酵母表達系統的Thermolabile Proteinase K(Cat#14809),該產品消化能力強、熱敏性好、純度高、殘留低。數據展示如下:


            消化能力強、熱敏感

            分別使用翌圣及進口品牌Supplier A的TLPK處理限制性內切酶PvuII后,使用處理后的PvuII對λDNA進行處理,結果顯示翌圣TLPK可有效抑制PvuII活性,且55℃條件下溫育10分鐘可使TLPK全熱失活,對后續反應體系中的添加的蛋白無影響。

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            圖1.消化能力與熱敏感性能驗證


            無核酸外切酶、切口酶、RNase殘留

            將0.12 U TLPK分別與核酸底物孵育,并通過瓊脂糖凝膠電泳分析譜帶變化。實驗結果表明,翌圣的3個批次TLPK均未檢測到核酸外切酶、切口酶或RNase殘留,為實驗結果的準確性和可靠性提供了有力保障。

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            圖2.核酸外切酶、切口酶、RNase殘留結果驗證


            為滿足多樣化實驗需求,翌圣生物精心推出蛋白酶K系列產品,涵蓋普通型與熱敏型兩大品類。普通型蛋白酶K適用于常規蛋白降解場景,而熱敏型產品則憑借快速熱滅活特性,為下游分子生物學實驗提供高效解決方案,為科研工作者提供精準適配的實驗工具選擇。


            產品名稱

            產品編號

            規格

            產品特點

            Proteinase K蛋白酶K

            10401ES

            100mg/1g/5 g/100g

            粉末狀,可以根據實驗要求,配制成目標濃度

            Proteinase K Solution蛋白酶K溶液(20 mg/mL)

            10412ES

            1 mL/10 mL/25 mL/500 mL

            液體,免配制,使用起來更方便

            Proteinase K Solution蛋白酶K溶液(低殘留)

            10410ES

            1 mL/5 mL/100 mL/1000 mL

            極低的背景菌殘留,更適合病原微生物核酸提取

            Thermolabile Proteinase K

            14809ES

            30 U/120 U

            熱敏款,適用于反應后需在溫和條件下去除蛋白酶K活性的場景或熱敏感樣本的處理



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