垂直電泳槽(雙板/四板)操作全解析：從灌膠到轉印的避坑手冊

　　垂直電泳槽(雙板/四板)操作全解析：從灌膠到轉印的避坑手冊

　　以下是天津本生 垂直電泳槽(雙板/四板)全流程操作解析及避坑指南，綜合結構差異與實驗優化要點：

　　一、?灌膠階段關鍵操作?

　　玻璃板組裝?

　　雙板槽需手動對齊玻璃板并密封橡膠框，四板槽采用凸輪卡鎖制膠框快速對齊;

　　玻璃板傾斜20°安裝(薄板略高于厚板)可有效防漏膠。

　　凝膠配制?

　　分離膠?：灌膠后覆蓋去離子水或無水乙醇壓平界面，避免波浪狀條帶;

　　濃縮膠?：插入梳子后需補膠，防止凝固收縮導致上樣孔變形。

　　防漏膠技巧?

　　檢查橡膠墊老化情況，優先選用高粘性軟墊;

　　四板槽需確保實驗臺絕對水平，避免多膠同步漏液。

　　二、?電泳運行優化?

　　問題? ?原因? ?解決方案?

　　條帶扭曲 電場不均或緩沖液陳舊 預電泳5分鐘平衡電場，更換新鮮緩沖液

　　內槽漏液 密封條老化或玻璃板未壓緊 更換密封條，雙手斜角位均勻擰緊螺絲

　　電泳速度過慢 電壓設置過低(雙板槽<200V) 四板槽可調至150V同步運行4塊膠

　　三、?轉印環節避坑要點?

　　膜處理?

　　PVDF膜需甲醇激活30秒，NC膜直接浸潤轉印緩沖液;

　　大蛋白(>100kDa)用0.45μm膜，小蛋白選0.22μm。

　　三明治組裝?

　　濾紙/膜/膠疊放后需用玻璃棒滾動排氣泡;

　　四板槽轉印時需獨立檢查每塊膠的轉印方向。

　　參數設置?

　　常規轉印條件：100V恒壓1小時(需冰浴);

　　高分子量蛋白建議降電壓至80V延長至2小時。

　　四、?維護與故障處理?

　　電極維護?：每月用10%醋酸浸泡鉑金絲10分鐘除鹽結晶;

　　漏液應急?：立即斷電，用瓊脂封堵縫隙后重啟;

　　冷卻系統?：四板槽優先選集成散熱設計，雙板槽需外接循環水(15-20℃)。

　　通過規范操作與針對性優化，可顯著提升垂直電泳的穩定性和重復性。

　　根據實驗通量、預算及操作復雜度綜合選擇，可參考廠商提供的兼容性參數(如天津本生雙板 BS-mini01　和四板 BS-mini04　)。

　　BS-300 基礎性電泳儀電源

　　BS-600C 通用型電泳儀電源

　　BS-mini01 垂直電泳槽(雙板)

　　BS-mini04 垂直電泳槽(四板)

　　BS-ZY03 轉印電泳槽(WB雙板和鉑樂通用)

　　BS-ZY04 轉印電泳槽 (WB四板)

　　BS-sub02 瓊脂糖電泳槽

　　注：以上資料僅供參考，具體請咨詢技術老師。

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