產(chǎn)酸克雷伯菌對(duì)實(shí)驗(yàn)鼠的危害與檢測(cè)

產(chǎn)酸克雷伯菌是克雷伯菌屬中的一個(gè)重要物種，形態(tài)呈直桿狀，通常較粗短，大多數(shù)菌株具有多糖莢膜，無(wú)鞭毛，無(wú)芽孢。

根據(jù)中國(guó)國(guó)標(biāo)GB14922-2022《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物、寄生蟲(chóng)學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)》產(chǎn)酸克雷伯菌未被列為SPF級(jí)動(dòng)物必須排除的病原體。

但杰克遜（JAX）實(shí)驗(yàn)室作為優(yōu)秀的遺傳資源庫(kù)和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物供應(yīng)商，對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的微生物質(zhì)量控制極為嚴(yán)格。產(chǎn)酸克雷伯菌被JAX實(shí)驗(yàn)室明確列為“排除性病原體”，即其供應(yīng)的所有品系實(shí)驗(yàn)動(dòng)物（尤其是免疫缺陷品系）均要求無(wú)此菌定植。免疫缺陷小鼠是該菌的高風(fēng)險(xiǎn)群體，研究發(fā)現(xiàn)，免疫缺陷小鼠中產(chǎn)酸克雷伯菌的檢出率達(dá)4.55%。

其造成的風(fēng)險(xiǎn)如下：

機(jī)會(huì)性致病性：可導(dǎo)致免疫缺陷小鼠（如NSG、NOG品系）的致命性感染（敗血癥、肺炎）。

干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果：在腸道、呼吸道或系統(tǒng)性感染模型中可能改變免疫反應(yīng)或病理結(jié)局。

耐藥性風(fēng)險(xiǎn)：其多重耐藥性可能影響抗生素治療實(shí)驗(yàn)的可靠性。

陽(yáng)性結(jié)果處理

立即隔離：陽(yáng)性動(dòng)物及同籠動(dòng)物移至獨(dú)立隔離設(shè)施。

群體處置：

免疫健全鼠：嘗試抗生素治療（根據(jù)藥敏，如阿米卡星+頭孢他啶）。

免疫缺陷鼠：直接淘汰（因治療無(wú)效且高致死風(fēng)險(xiǎn)）。

設(shè)施凈化：

過(guò)氧化氫蒸氣或含氯消毒劑處理環(huán)境；

連續(xù)3次環(huán)境檢測(cè)陰性（間隔1周）后方可重啟。

質(zhì)量控制體系

標(biāo)準(zhǔn)菌株：ATCC13182定期驗(yàn)證PCR及生化試驗(yàn)準(zhǔn)確性。

環(huán)境監(jiān)測(cè)：每月對(duì)IVC籠具出風(fēng)口、飲水系統(tǒng)采樣，采用PCR篩查。

人員操作：無(wú)菌服+手套+口罩，單向物流避免交叉污染。

滅菌管理：

飼料/墊料：121℃高壓滅菌30分鐘或鈷-60輻照（≥25kGy）；

飲水：酸化處理（pH2.5-3.0）抑制革蘭陰性菌生長(zhǎng)。

JAX實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方法

選擇性培養(yǎng)+生化確認(rèn)

麥康凱瓊脂分離→挑取粘稠乳糖發(fā)酵（粉紅色）菌落→革蘭染色→關(guān)鍵生化試驗(yàn)（吲哚+、鳥(niǎo)氨酸+）。輔助檢測(cè)：VP試驗(yàn)（+）、檸檬酸鹽利用（+）、尿素酶（+）

PCR檢測(cè)

金標(biāo)準(zhǔn)方法：使用多種特異性引物,靈敏度高（可檢測(cè)低載量菌），特異性強(qiáng)。

測(cè)序驗(yàn)證

對(duì)疑似菌株進(jìn)行基因測(cè)序確認(rèn)。

JAX實(shí)驗(yàn)室相比普通商業(yè)供應(yīng)商的培養(yǎng)法+生化鑒定更注重PCR實(shí)驗(yàn)。翼和病原菌檢測(cè)試劑盒能夠很好的檢測(cè)產(chǎn)酸克雷伯菌在內(nèi)的多種病原微生物，符合實(shí)驗(yàn)室的要求，使用的Biowing®Common Bacteria Primer&Probe能夠匹配到目標(biāo)病原微生物的DNA。