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薄層色譜法標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
2020年05月30日 08:40:17
來(lái)源：化工儀器網(wǎng) 點(diǎn)擊量：7001
薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，常用于進(jìn)行藥品的鑒別，雜質(zhì)檢查或含量測(cè)定。在使用時(shí)，會(huì)將適宜的固定相涂布于玻璃板上，成一均勻薄層，等點(diǎn)樣、展開(kāi)后，與適宜的對(duì)照物按同法所得的色譜圖作對(duì)比。
【化工儀器網(wǎng) 技術(shù)指導(dǎo)】薄層色譜法是快速分離和定性分析少量物質(zhì)的一種很重要的實(shí)驗(yàn)技術(shù)，常用于進(jìn)行藥品的鑒別，雜質(zhì)檢查或含量測(cè)定。在使用時(shí)，會(huì)將適宜的固定相涂布于玻璃板上，成一均勻薄層，等點(diǎn)樣、展開(kāi)后，與適宜的對(duì)照物按同法所得的色譜圖作對(duì)比。
操作方法：
1. 薄層板制備：將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合，去除表面的泡后，倒入涂布器中，在玻璃板上平穩(wěn)地移動(dòng)涂布器進(jìn)行涂布(厚度為0.2—0.3mm)，取下涂好薄層的玻璃板，置水平臺(tái)上于室溫下晾干，后在110℃烘30分鐘。即置有干燥劑的干燥箱中備用。使用前檢查其均勻度。
2. 點(diǎn)樣：用點(diǎn)樣器點(diǎn)樣于薄層板上，一般為圓點(diǎn)，點(diǎn)樣基線距底邊2.0cm，點(diǎn)樣直徑為2——4mm，點(diǎn)間距離約為1.5—2.0cm。點(diǎn)間距離可視斑點(diǎn)擴(kuò)散情況以不影響檢出為宜，點(diǎn)樣時(shí)必須注意勿損傷薄層表面。
3. 展開(kāi)：展開(kāi)室如需預(yù)先用展開(kāi)劑飽和，可在室中加入足夠量的展開(kāi)劑，并在壁上貼二條與室一樣高、寬的濾紙條，一端浸入展開(kāi)劑中，密封室頂?shù)纳w，使系統(tǒng)平衡或按正文規(guī)定操作。將點(diǎn)好樣品的薄層板放入展開(kāi)室的展開(kāi)劑中，浸入展開(kāi)劑的深度為距薄層板底邊0.5—1.0cm，密封室蓋。
4. 檢測(cè)：等展開(kāi)至規(guī)定距離，取出薄層板，晾干，按各品種項(xiàng)下的規(guī)定檢測(cè)，如需用薄層掃描儀對(duì)色譜斑點(diǎn)作掃描檢出，或直接在薄層上對(duì)色譜斑點(diǎn)作掃描定量，則可用薄層掃描法。薄層掃描的方法，除另有規(guī)定外，可根據(jù)各種薄層掃描儀的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及使用說(shuō)明，結(jié)合具體情況，選擇吸收法或熒光法，用雙波長(zhǎng)或單波長(zhǎng)掃描。由于影響薄層掃描結(jié)果的因素很多，故應(yīng)在保證供試品的斑點(diǎn)在一定濃度范圍內(nèi)呈線性的情況下，將供試品與對(duì)照品在同一塊薄層上展開(kāi)后掃描，進(jìn)行比較并計(jì)算定量，以減少誤差。
注意事項(xiàng)：
1. 所用玻璃板應(yīng)洗凈不掛水珠，光滑平整。
2. 鋪板要均勻，厚度適宜，并于室溫下晾干后在110℃活化30分鐘，置于有干燥劑的干燥箱或干燥器中備用。
3. 點(diǎn)樣點(diǎn)一般為圓點(diǎn)，不能太大。
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