1范圍

本標準規定了 食品中霉菌和酵母 (moulds and yeasts)的計數方法

本標準第一法適用于各類食品中霉菌和酵母的計數,第二法適用于番茄醬罐頭、番茄汁中霉菌的計數。

2設備和材料

除微生物實驗室常規滅菌及培養設備外，其他設備和材料如下：

• 2.1 培養箱：28°C士1°C。

• 2.2 拍擊式均質器及均質袋。

• 2.3電子天平：感量 0.1g。

• 2.4 無菌錐形瓶：容量 500 mL。

• 2.5 無菌吸管：1 ml（具0.01ml,刻度）、10 ml（具0.1 ml.刻度）。

• 2.6 無菌試管：18 mm × 180 mm。

• 2.7 旋渦混合器。

• 2.8 無菌平四：直徑 90 mm。

• 2.9 恒溫水浴箱：46°C士1°。

• 2.10 顯微鏡：10倍~100倍。

• 2.11 微量移液器及槍頭：1.0 ml。

• 2.12 折光儀。

• 2.13 郝氏計測玻片：具有標準計測室的特制玻片。

• 2.14 蓋玻片。

• 2.15 測微器：具標準刻度的玻片。

操作步驟

5.1 樣品的稀釋

5.1.1 固體和半固體樣品：稱取25g樣品，加人 225 ml. 無菌稀釋液(蒸餾水或生理鹽水或磷酸鹽緩沖液），充分振搖，或用拍擊式均質器拍打 1min~2min,制成1：10的樣品勻液。

5.1.2 液體樣品：以無菌吸管吸取25mL 樣品至盛有225 mL 無菌稀釋液(蒸餾水或生理鹽水或磷酸鹽緩沖液)的適宜容器內(可在瓶內預置適當數量的無菌玻璃珠)或無菌均質袋中，充分振搖或用拍擊式

均質器拍打 1 min~2 min.制成1：10的樣品勻液。

5.1.3 取1ml1：10樣品勻液注人含有9 mL 無菌稀釋液的試管中,另換一支1mL 無菌吸管反復吹吸，或在旋渦混合器上混勻，此液為 工：100 的樣品勻液。

5.1.4 按5.1.3操作,制備 10 倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋一次，換用1支1ml 無菌吸管。

5.1.5 根據對樣品污染狀況的估計，選擇2個～3個適宜稀釋度的樣品勻液(液體樣品可包括原液)，在進行10倍遞增稀釋的同時，每個稀釋度分別吸取1ml 樣品勻液于2個無菌平四內。同時分別取1 ml

無菌稀釋液加人2個無菌平皿作空白對照。

5.1.6 及時將20 mL~25ml- 冷卻至46°C 的馬鈴薯葡萄糖瓊脂或孟加拉紅瓊脂（可放置于 46°士

1°C恒溫水浴箱中保溫，傾注平四，并轉動平皿使其混合均勻。置水平臺面待培養基基本凝固。

5.2 培養

瓊脂凝固后，正置平板，置28°C士1°C培養箱中培養，觀察并記錄培養至第5d的結果。

5.3 菌落計數

用肉眼觀察，必要時可用放大鏡或低倍鏡，記錄稀釋倍數和相應的霉菌和酵母菌落數。以菌落形成單位(colony-forming units, CFU)表示。

選取菌落數在 10 CFU~150 CFU 的平板,根據菌落形態分別計數霉菌和酵母。霉菌蔓延生長覆

蓋整個平板的可記錄為菌落蔓延。

6結果與報告

6.1結果

6.1.1 計算同一稀釋度的兩個平板菌落數的平均值，再將平均值乘以相應稀釋倍數。

6.1.2 若有兩個稀釋度平板上菌落數均在 10 CFU~150 CFU 之間，則按照GB 4789.2的相應規定進行計算。

6.1.3 若所有平板上菌落數均大于 150 CFU，則對稀釋度最高的平板進行計數，其他平板可記錄為多

不可計,結果按平均菌落數乘以最高稀釋倍數計算。

6.1.4 若所有平板上菌落數均小于 10 CFU,則應按稀釋度的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。

6.1.5 若所有稀釋度(包括液體樣品原液)平板均無菌落生長,則以小于 1乘以稀釋倍數計算。

6.1.6 若所有稀釋度的平板菌落數均不在 10 CFU~150 CFU 之間,其中一部分小于 10 CFU 或大于

150 CFU 時，則以 10 CFU 或 150 CFU 的平均菌落數乘以稀釋倍數計算。

6.2 報告

6.2.1 菌落數按“四舍五人”原則修約。菌落數在 10以內時，采用一位有效數字報告;菌落數在 10~

100 之間時,采用兩位有效數宇報告。

6.2.2 菌落數大于或等于 100 時,前第了位數字采用“四舍五人”原則修約后，取前2位數字,后面用。

代替位數來表示結果;也可用10 的指數形式來表示,此時也按“四舍五人”原則修約,采用兩位有效數字。

6.2.3 若空白對照平板上有菌落出現,則此次檢測結果無效。

6.2.4 稱重取樣以CFU/g 為單位報告,體積取樣以 CFU/mL 為單位報告，報告或分別報告霉菌和/或

酵母數。

• ZSH-150F生化培養箱

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