凱氏定氮法是目前測(cè)定食品和飼料中氮和蛋白質(zhì)含量常用的方法，具有較高的精密度和重現(xiàn)性，且應(yīng)用簡(jiǎn)單。現(xiàn)代凱氏定氮法是在400℃以上的消化溫度下，在硫酸和硫酸鹽的沸騰混合物中催化支持有機(jī)物質(zhì)礦化的過(guò)程。在此過(guò)程中，有機(jī)結(jié)合氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨。堿化消化后的溶液釋放出氨氣，氨氣經(jīng)定量蒸汽蒸餾后用滴定法測(cè)定。

樣  品：

液態(tài)牛奶，全脂及巴氏殺菌

蛋白標(biāo)簽值:3.35 g/100 ml，文獻(xiàn)中酪蛋白含量:2.66%

儀  器： 意大利VELP凱氏定氮儀 UDK 159 +消化爐DKL 20 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

      以濾液(V濾液)體積乘0,4為樣本量，計(jì)算非酪蛋白氮(NCN)的結(jié)果為氮的百分比。其計(jì)算公式如下:NCN% = mg N / [(G milk/V sol) x 1000 x V filtrate] x 100

       G牛奶=牛奶重量(20克)

       V sol= 含所有分離所需化學(xué)物質(zhì)的牛奶溶液，容量(50毫升)

       V濾液=用于進(jìn)行1分析的濾液(ml)

對(duì)全脂牛奶的修正系數(shù)0.994(半脫脂牛奶的修正系數(shù)為0.998)進(jìn)行了輸出和相乘。計(jì)算酪蛋白時(shí)考慮到全脂牛奶中測(cè)定的總氮含量(Ntot)為0.525%。(關(guān)于Ntot，請(qǐng)參閱應(yīng)用說(shuō)明“牛奶中N/蛋白含量測(cè)定采用凱氏定氮法”)

     以含28 mg氮的5 ml甘氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液(3%)為對(duì)照品，對(duì)整個(gè)過(guò)程進(jìn)行驗(yàn)證。所得回收率在98% ~ 102%之間，符合預(yù)期范圍。所得結(jié)果與預(yù)期值相符，可靠，重現(xiàn)性好，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差低(RSD < 1%)，結(jié)果重復(fù)性好。

研究意義：

    酪蛋白含量由牛奶中總氮(Ntot)含量與非酪蛋白氮(NCN)含量的差值決定，該差值按本文所述程序計(jì)算。 牛奶蛋白是古老和廣泛食用的食物蛋白。目前，人們對(duì)這些物質(zhì)在營(yíng)養(yǎng)領(lǐng)域和技術(shù)應(yīng)用方面都有很大的興趣。酪蛋白是一種參與奶酪和發(fā)酵牛奶生產(chǎn)的蛋白質(zhì)家族。它們不僅是乳制品生產(chǎn)中非常重要的氮化合物，而且是醫(yī)藥中的添加劑，在化妝品、油漆和粘合劑中都有技術(shù)用途。

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