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紅曲米粉中桔青霉素的測定—HPLC法解決方案
紅曲米粉是指以大米為原料，用紅曲菌屬(Monascus spp)紅曲霉發酵培養制得，具有紅色的顆粒或用其制成的粉末。目前紅曲可分為色曲、酒曲和功能性紅曲。在紅曲霉的發酵過程中，同時與紅曲色素相伴產生一種有害的次級代謝產物--桔青霉素。研究表明桔青霉素具有腎毒性，可致畸、致癌和誘發基因突變。桔青霉素的存在，制約了紅曲在食品及藥品方面的廣泛應用，在一定程度上阻礙了紅曲產業的發展。
目前紅曲米粉中桔青霉素檢測難點是凈化效果差，影響目標物的定性與定量。
方法優勢：
迪馬科技依照國標《QB/T 2847-2007 功能性紅曲米(粉)》中樣品預處理方法及HPLC條件，配合使用固相萃取柱進行凈化，建立了紅曲米粉中桔青霉素的測定方法，該方法：
采用95%甲醇水超聲提取，濃縮經混合型強陰離子交換柱凈化，運用HPLC-FLD測定；
本方法定量限是10 μg/kg，回收率達90%以上，保證實驗結果的準確性、重現性；
本方案具有前處理簡單，回收率高，除雜效果明顯、方法重現性好等優點；
適用于各省市出入境、質檢、疾控、食品藥品檢驗所、第三方檢測機構、食品檢測機構、大型食品生產商、高校和科研院所等。
以下為詳細解決方案，敬請參考！
紅曲米粉中桔青霉素的測定—HPLC法
1、適用范圍
本方案適用于紅曲米粉中桔青霉素的檢測，方法定量限是10 μg/kg。
2、提取
1.0 g樣品，加入10 mL 95%甲醇水溶液，混勻，超聲10 min，間隔振蕩，6000 rpm離心2 min，取上清液；
向下層殘渣中加入8 mL 95%甲醇水溶液，混勻，超聲10 min，間隔振蕩，6000 rpm離心2 min，合并上清液；
將上清液在35 ℃水浴下減壓蒸餾至剩水，加入2 mL甲醇，超聲溶解，6000 rpm離心1 min，取上清液，待凈化。
3、凈化——ProElut PXA 60 mg/3 mL（Cat#：68303）
a活 化： | 加入3 mL甲醇活化； |
b上 樣： | 加入待凈化液，棄去流出液； |
c淋 洗： | 加入3 mL 5%甲酸甲醇溶液，棄去流出液； |
d洗 脫： | 加入2 mL 0.2 M鹽酸甲醇溶液，收集流出液，供HPLC分析。 |
4、色譜條件
色譜柱：Platisil ODS，150 x 4.6 mm，5 μm（Cat#：99501）
流 速：1.0 mL/min 進樣量：20 μL 柱 溫：28 ℃
檢測器：FLD，Ex：331 nm；Em：500 nm
流動相：A：1% 磷酸水溶液 B：乙腈 A：B=57：43
5、添加回收結果
紅曲米粉中桔青霉素的HPLC檢測添加回收結果
樣品 | 添加水平(mg/kg) | 回收率（%） |
紅曲米粉 | 0.05 | 97.53 |
0.20 | 97.23 |
桔青霉素標準品(0.025 mg/L)液相色譜圖
桔青霉素標準品(0.1 mg/L)液相色譜圖
添加水平為0.05 mg/kg紅曲米粉中桔青霉素檢測液相色譜圖
添加水平為0.20 mg/kg紅曲米粉中桔青霉素檢測液相色譜圖
紅曲米粉中桔青霉素檢測(空白樣品)的液相色譜圖
紅曲米粉中桔青霉素的測定—HPLC法相關產品信息：
貨號 | 名稱 | 規格 |
樣品前處理 | ||
68303 | ProElut PXA | 60 mg/3 mL, 50/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
4803 | 1,3,6mL柱管通用連接器 | 15/pk |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正壓兩用泵，無油 | 1/pk |
99013 | 抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) | 1/pk |
30039 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
30040 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
標準品 | ||
50D-22958-5MG | 桔青霉素[518-75-2] | 5 mg |
色譜柱及保護柱 | ||
99501 | Platisil ODS 寬pH范圍型反相色譜柱 | 150 x 4.6 mm，5 μm |
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑 | ||
50144 | 甲酸 HPLC級 | 50 mL |
50101 | 乙腈 HPLC級 | 4 L |
50102 | 甲醇 HPLC級 | 4 L |
50133 | 磷酸 HPLC級 | 50 mL |
通用色譜產品 | ||
52401B | 瓶架/藍色（現貨） | 50孔 |
52401A | 瓶架/白色（現貨） | 50孔 |
1034 | 樣品瓶（棕色/螺紋） | 2 mL, 100/pk |
1035 | 樣品瓶蓋/含墊（已經組裝） | 100/pk |
H80465 | HPLC 進樣針 | 25 μL |
紅色產品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*