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花生油和糧谷中黃曲霉毒素的檢測——UPLC-MS/MS法
黃曲霉毒素包括B1、B2、G1、G2、M1、M2等多種形式，但是目前有關這些毒素的檢測方法很少，且以酶聯免疫(ELISA)法和薄層色譜(TLC)法等篩選方法檢測黃曲霉毒素B1為主；液相色譜法(HPLC)容易受到雜質干擾，而且檢出限很難達到要求。液相色譜-串聯質譜(HPLC-MS/MS)是一種集分離和多組分定性、定量于一體的系統，已成為近年來研究黃曲霉毒素檢測的主要方向，并已經應用到黃曲霉毒素的污染檢測中。
方法優勢：
迪馬科技開發的《花生油和糧谷中黃曲霉毒素的檢測-UPLC-MS/MS法》采用固相萃取-UPLC-MS/MS法，可同時檢測5種黃曲霉毒素，并能夠達到準確定性定量，檢出限是0.5 μg/kg，遠低于國家標準《GB 2761-2011 食品安全國家標準 食品中真菌毒素*》；對比國標方法《GB/T 18979-2003 食品中黃曲霉毒素的測定 免疫親和層析凈化液相色譜法和熒光光度法》，本方案具有：
前處理步驟簡單、回收率高、方法穩定性好、凈化效果優異等特點；
避免了免疫親和柱容易受環境影響而引起黃曲霉毒素回收率低和凈化效果不好的弊端，保證了實驗結果的重現性和準確性；
過柱方法簡單易操作，對操作人員要求不高，檢測成本相對較低，能被很多企事業單位采用。
以下為詳細解決方案，敬請參考！
花生油和糧谷中黃曲霉毒素的檢測——UPLC-MS/MS法
1、適用范圍
本方案適用于花生油、小米、高粱、糙米等樣品中黃曲霉毒素的檢測。本方案定量限是0.5 μg/kg。
2、提取
稱取2.0 g 樣品，加入8 mL 85%乙腈水，振蕩2 min，超聲10 min，6000 rpm離心2 min，收集上清液，待凈化。
3、凈化——ProElut AFT-3 12 mL（Cat#：65915）
將待凈化液加入柱中，收集2 mL流出液，在50 ℃水浴下減壓蒸干，用初始流動相定容到1 mL，過膜上機分析。
4、分析條件
4.1 UPLC 條件：
色譜柱：Leapsil C18，100 × 2.1 mm，2.7 μm (Cat#：86005)
流 速：0.3 mL/min
進樣量：5 μL
柱 溫：40 ℃
流動相：乙腈：0.1% 甲酸水
梯度
時間（min） | 0 | 6 | 7 | 15 |
乙腈（%） | 30 | 70 | 30 | 30 |
0.1% 甲酸水（%） | 70 | 30 | 70 | 70 |
4.2質譜條件：
電離模式：ESI | 掃描方式：正離子掃描 |
檢測方式：多反應監測 | 電噴霧電壓：5500 V |
霧化氣壓力：50 psi | 輔助氣壓力：50 psi |
氣簾氣壓力：20 psi | 離子源溫度：500 ℃ |
定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表
藥物名稱 | 定性離子對 （m/z） (母離子/子離子) | 定量離子對 （m/z） (母離子/子離子) | 碰撞氣能量/eV | 去簇電壓/V |
AFB1 | 313.0/241.0 | 313.0/241.0 | 51 | 78 |
313.0/285.0 | 51 | |||
AFB2 | 315.0/259.0 | 315.0/259.0 | 40 | 77 |
315.0/287.0 | 40 | |||
AFG1 | 329.0/200.0 | 329.0/200.0 | 56 | 74 |
329.0/243.0 | 56 | |||
AFG2 | 331.0/189.0 | 331.0/189.0 | 60 | 61 |
331.0/313.0 | 60 | |||
AFM1 | 329.0/273.0 | 329.0/273.0 | 40 | 64 |
329.0/243.0 | 40 |
5、添加回收結果
糧谷及油類樣品中黃曲霉毒素檢測（添加水平10 μg/kg）的添加回收結果（%）
基質 | AFB1 | AFB2 | AFG1 | AFG2 | AFM1 |
花生油 | 94.0 | 102.4 | 106.6 | 93.2 | 96.2 |
糙米 | 96.0 | 99.2 | 87.2 | 108.4 | 87.6 |
高粱 | 94.4 | 93.8 | 86.4 | 95.0 | 92.6 |
小米 | 96.8 | 90.6 | 112.8 | 91.4 | 89.0 |
5種黃曲霉毒素10 μg/L MRM色譜圖
黃曲霉毒素B1 10 μg/L XIC色譜圖
黃曲霉毒素B2 10 μg/L XIC色譜圖
黃曲霉毒素G1 10 μg/L XIC色譜圖
黃曲霉毒素G2 10 μg/L XIC色譜圖
黃曲霉毒素M1 10 μg/L XIC色譜圖
花生油和糧谷中黃曲霉毒素檢測—UPLC-MS/MS法相關產品信息：
貨號 | 名稱 | 規格 |
樣品前處理 | ||
65915 | ProElut AFT-3 | 12 mL, 20/pk |
244358 | 12管防交叉污染真空SPE萃取裝置 | 12位 |
4806 | 考克(控制流量) | 15/pk |
99011 | 真空/正壓兩用泵，無油 | 1/pk |
99013 | 抽濾瓶套裝 (包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞) | 1/pk |
30039 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.22 μm 100/pk |
30040 | FitMax針頭式過濾器 Nylon | 13 mm,0.45 μm 100/pk |
標準品 | ||
82O-S02017-1ML | 黃曲霉毒素B1(AFB1) [1162-65-8] | 2 μg/mL溶于乙腈, 1 mL |
82O-S02018-1ML | 黃曲霉毒素B2(AFB2) [7220-81-7] | 0.5 μg/mL溶于乙腈,1 mL |
82O-S02019-1ML | 黃曲霉毒素G1(AFG1) [1165-39-5] | 2 μg/mL溶于乙腈, 1 mL |
82O-S02020-1ML | 黃曲霉毒素G2(AFG2) [7241-98-7] | 0.5 μg/mL溶于乙腈,1 mL |
82O-S02030-1ML | 黃曲霉毒素M1(AFM1) [6795-23-9] | 0.5 μg/mL溶于乙腈,1 mL |
色譜柱及保護柱 | ||
86005 | Leapsil C18 2.7 μm UHPLC/HPLC 兼容反相色譜柱 | 100×2.1 mm，2.7 μm |
HPLC溶劑?緩沖鹽?離子對試劑 | ||
50101 | 乙腈 HPLC級 | 4 L |
50144 | 甲酸 HPLC級 | 50 mL |
通用色譜產品 | ||
52401B | 瓶架/藍色（現貨） | 50孔 |
52401A | 瓶架/白色（現貨） | 50孔 |
1034 | 樣品瓶（棕色/螺紋） | 2 mL, 100/pk |
1035 | 樣品瓶蓋/含墊（已經組裝） | 100/pk |
H80465 | HPLC 進樣針 | 25 μL |
紅色產品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*