近年來，生物藥由于其在臨床治療中的優良表現發展迅猛，成為了制藥行業不可抵擋的新趨勢。在生物藥研發、生產過程中，企業通過引入關鍵質量因素（CQA）對整個藥物質量進行控制，以保證生物藥安全性和有效性。這些CQA包括氨基酸序列、聚集體、電荷異質性、糖型和肽圖等，其中聚集體和電荷異質性分別采用尺寸排阻色譜（SEC）、離子交換色譜（IEX）進行分析。

在使用SEC或IEX進行色譜分析過程中，通常使用高離子強度流動相，比如高濃度磷酸鹽和氯化鈉溶液，甚至pH分析條件。在這些條件下，可能會導致系統堵塞或泵頭腐蝕。此外，蛋白質易與固定相填料或液相系統管路之間發生次級交互作用或吸附作用，產生色譜峰形拖尾，以影響色譜分離。這樣高鹽分析條件和蛋白類生物藥*性質給液相色譜儀分離帶來嚴峻的挑戰。

Nexera Bio生物兼容液相系統來啦！??！

島津生物兼容液相Nexera Bio系統流路采用生物惰性材料，不僅耐腐蝕，而且能減少生物大分子的吸附，保證生物大分子的完整性，有效保障分析重復性和儀器耐用性。

圖1  Nexera Bio生物兼容液相系統

Nexera Bio生物兼容液相系統特點：

• 泵頭、混合器、進樣針、樣品環和接頭配件等均采用生物惰性材料，耐腐蝕、抗吸附；

•耐高壓不銹鋼包覆的Peek管路，提升系統耐壓至66MPa；

•標配輸液泵柱塞清洗蠕動泵，有效降低鹽析，實現良好的送液穩定性，并防止泵頭腐蝕。

舉些“栗子”，帶您一窺究竟

•聚集體分析

圖2  mAb二聚體分析

通過優化尺寸排阻色譜（SEC）分析單克隆抗體（mAb）的流動相組成，得到150 mmol/L磷酸鈉緩沖液和150 mmol/L氯化鈉溶液的較優流動相條件。通過圖2對比圖可知該單抗在普通液相系統條件下拖尾嚴重，但在Nexera Bio系統下峰形對稱性良好，無拖尾現象。此外，重復性結果顯示，二聚體和單體的保留時間和峰面積的RSD%均小于0.5%，重復性良好（表1）。實驗數據表明Nexera Bio生物兼容色譜系統和Shim-pack Bio SEC色譜柱在SEC分析中，可以提供良好色譜峰型，帶來快速有效分離，保證穩定可靠分析。

電荷異質性分析

圖3  鹽梯度方法下mAb的電荷異質體分析

采用Shim-pack Bio IEX和Nexera Bio生物兼容液相系統，在鹽梯度方法下進行mAb的電荷異質體分布，在5min內實現了電荷異質體的高度分離。3.448min處的峰被命名為主峰。主峰之前和之后的峰分別被稱為酸性峰和堿性峰。mAb的電荷異質體的主峰約占50.99%，酸性峰和堿性峰分別占34.94%和14.07%。且六針重復測定結果表明重現性非常好，所有峰保留時間RSD%均小于1%，主峰，酸性峰和堿性峰的峰面積RSD%均小于2%。實驗數據表明Nexera Bio生物兼容色譜系統穩定可靠。

后小編還是要強調下在使用SEC或IEX進行色譜分析過程中，不管是高鹽還是pH條件，Nexera Bio均可長期耐受，不會造成儀器的腐蝕或堵塞等問題，更重要的是在分析過程中蛋白類藥物無吸附，無拖尾，乘風破浪，確保生物藥分析結果的穩定可靠。