前言b2 受體激動劑是一種在肉類生產中違法使用的生長促進劑，能提高瘦肉率。它們是一種代謝調節劑，能將通常用于產生脂肪的能量轉換成產生瘦肉的能量。最近，由于豬肉中高濃度 b2 受體激動劑(瘦肉精)導致的中毒事件時有發生。本應用使用安捷倫 Bond ElutPlexa PCX SPE 柱從豬肉中提取和富集 11 種 b2 受體激動劑，然后用 LC-MS/MS 進行定量分析。表 1 是 11 種 b2 受體激動劑的化合物名和結構。

實驗試劑和化學品所有試劑都是質譜、液相色譜或分析純級別。乙腈和水購自 Honeywell。標準品購自中國藥品生物制品檢定所(NICPBP)。豬肉購自當地超市。標準溶液 (1.0 mg/mL) 用甲醇分別配制，并儲存在–20 °C。混合工作溶液 (10 µg/mL) 用乙腈/水(10:90)配制并儲存在 4 °C 的條件下。加標溶液每周用混合工作溶液加適量水新鮮配制。儀器和材料安捷倫 1200 高效液相色譜儀安捷倫 6460 三重串聯四極桿液質聯用儀安捷倫 Bond Elut Plexa PCX 萃取柱，60 mg，3 mL (p/n 12108603)安捷倫 Poroshell 120 EC-C18 窄徑柱，2.1 × 100 mm，2.7 µm (p/n695775-902)安捷倫 Vac Elut 20 Manifold (p/n 12234101)

樣品制備液-液萃取稱取 5 克豬肉樣品(±0.01 g)，放入 50 mL 帶蓋的聚丙烯管中。加入 20 mL 的 0.2 M 醋酸鈉 (pH 5.2) 溶液，渦旋混勻。然后加入250 µL b-葡萄糖醛酸酶(1000 U/mL)，渦旋振蕩 2 分鐘*混勻樣品，然后置于 37 °C 下反應 16 小時。酶解物振蕩 15 分鐘，然后在 4000 rpm 下離心 10 分鐘，將 4 mL 上清液轉移至另一個離心管中。加入 0.1 M 的高氯酸溶液調節 pH 至1 ± 0.3。在 4000 rpm 下離心 10 分鐘，將上清液轉移至另一只離心管中。用10M 氫氧化鈉溶液將 pH 調至 11。加入 10 mL 飽和氯化鈉溶液和 10 mL 異丙醇-乙酸乙酯 (60:40) 并振蕩 5 分鐘。在 4000 rpm 下離心 5 分鐘，將有機層小心地轉移至另一個離心管中。再次加入異丙醇-乙酸乙酯萃取，振蕩，離心并收集上清液，重復兩次，然后將所有的上清液合并。在 40 °C 下用氮氣吹干。殘留物用 5 mL 0.2 M 醋酸鈉 (pH 5.2) 復溶。所得樣品用于稍后的 SPE 純化。

固相萃取固相萃取的步驟見圖 1。安捷倫 Bond Elut Plexa PCX 萃取柱用3 mL 甲醇和 3 mL 水活化。將 5 mL 樣品溶液移到萃取柱上，通過重力作用（約 1 mL/min）通過萃取柱。然后用 2 mL 水和 2 mL 2%的甲酸溶液淋洗萃取柱。在最高真空度下維持 3 分鐘，使萃取柱*干燥。用 5 mL 5%的氨水甲醇溶液洗脫(流速 1 mL/min)。洗脫液用 40 °C 氮氣吹干。用 1 mL 含 0.1% 甲酸的 水/乙腈 (90:10) 溶液復溶。樣品通過渦旋振蕩和超聲使殘留物*溶解，然后用0.45 µm 膜過濾。樣品轉移至 1.5 mL 樣品管，并在 3000 轉下離心5 分鐘。上清液轉移至 2mL 色譜樣品瓶，用于分析。

結論本研究表明，安捷倫 Bond Elut Plexa PCX 可以被用于復雜基質樣品，如豬肉中 b2 受體激動劑的高效純化和富集。基質加標樣品的b2 受體激動劑的回收率和重現性都滿足法規的要求。樣品的基質效應和雜質含量都非常低，沒有影響各目標化合物的定量分析。定量限 (LOQ) 遠低于法規的最大殘留 (MRL)。[1,2]