花青素是存在于許多水果和花朵中使之呈現亮紅色和藍色（和紫色）的天然色素。藍莓的顏色就是由水果中許多不同的花青素形成的。對花青素進行定性和定量分析可以用來區分藍莓植物的品種和鑒定其品質。因此，花青素的色譜分離在農業和制酒業越來越受到重視。最近，對花青素作為抗氧化/抗癌劑醫藥作用的興趣促使了人們研究其色譜分離的興趣。

 

要點提示

• 通常，在這些分離中使用低 pH 值的流動相（含有甲酸）會造成色譜柱鍵合相降解和分離改變(Goiffon, J.-P., Brun, M., and Bourrier, M.-J., J.Chromatogr. 537 101-121, 1991)。但 ZORBAXStableBond SB-C18 色譜柱能在很低 pH值的反相色譜分離條件下提供長期的穩定性

• 實驗中使用磷酸取代傳統流動相中添加的甲酸，結果在 ZORBAX SB-C18 色譜柱上實現了大于 25種花青素的更好的分離

• 鑒于產品的重復性和擁有窄粒徑分布的更小色譜填料 (3.5 µm)，分析人員可以通過系統地改變色譜柱規格來節約時間和溶劑

條件:ZORBAX SB-C18 (4.6 x 250 mm, 5 µm; 4.6 x 150 mm,3.5 µm; 4.6 x 75 mm; 3.5 µm)(安捷倫部件號分別為: 880975-902, 863953-902, 866953-902)流動相: A: 3% 磷酸 B: * 甲醇, 梯度: (見各自色譜圖)進樣: 20 µL, 1 mL/min, 30 ºC,檢測: 紫外波長 (525 nm),樣品制備: (見背面)

 

制備藍莓提取物的方法*開始混合: 10 g 藍莓10 ml 溶劑（ 70:28:2, 甲醇:水:甲酸）冰上混合10分鐘通過玻璃棉過濾至 10 ml 注射器濾液靜置1小時過0.2 µm 濾膜立即注入50 µL 進行高效液相色譜分析