尋求改進質量和提高效率的藥品生產商對使用Sievers^® 總有機碳（TOC）分析儀進行清潔驗證的興趣越來越濃。大多數制藥或生物科技廠家目前都配有TOC分析儀以符合美國藥典USP、中國藥典ChP的水檢測要求，以放行純化水或注射用水用于清潔或生產過程。因此，大多數廠家已經擁有用于清潔驗證的TOC測定方法。

1996年，國際協調會議（ICH）在FDA（CDER & CBER^②）的協助下，創建了指導文件《Q2B：分析步驟的驗證》。該文檔的目的是為制藥公司如何考慮清潔驗證分析程序的各種驗證特征提供參考。本文提供了與下列參數相關的多個實例，這些實例均與TOC方法驗證有關，因而此應用說明呼應了Q2B指導文件：

• 檢出限和定量限
  

• 確定分析物的準確度和精確度
  

• 線性和回收百分比
  

• 分析方法的穩固性^③

檢出限和定量限

檢出限（LOD）用于評估何時信號是儀器噪音的結果還是化合物的反應。LOD被視為樣本中分析物的zui低檢測量，但沒有必要的足夠的統計確定性來定量。

確定分析物的準確度和精確度

了解TOC分析方法驗證中準確度和精確度的區別非常重要。準確度與測得值和分析物的真實值的接近程度相關。通常，準確度是計算儀器驗證時測得的標準品的TOC濃度與預期的標準品TOC濃度的差值百分比（即+7%）所得。

線性和回收百分比驗證

通常，線性測試校驗儀器反應值是否與所研究分析物的濃度具有線性關系。圖1演示了TOC濃度范圍從1.00 ppm到7.50 ppm，牛血清白蛋白（BSA）的線性關系，其中含低TOC水的小瓶中加了已知濃度的BSA。這個例子演示了理論濃度（x軸）對所測得的濃度（y軸）作圖所得到的兩者之間的線性關系，y=(m)x+b。分析儀的反應值與所研究化合物的相關系數（R2）應大于0.97。

分析方法的穩固性

與實際回收率同樣重要的是，用于確定所研究化合物回收百分比的TOC分析方法的重現性或穩健性。在清潔驗證方法開發中穩固性是指結果不受方法中參數、或樣本之間的小而微妙的變化的影響的能力。還提供了正常使用期間的可靠性指示（例如各個分析員的取樣方法）。若希望得到高回收率，回收率一直保持可重復性也同等重要或更為重要，并在整個方法開發期間一直需要對回收率進行檢測。表1和表2提供了CIP-100棉簽回收率分析信息，由兩個不同的分析員測試樣本間的變化。

要考慮的最后幾點

評估制藥產品質量水平的測試步驟要遵從各項要求。具體到清潔驗證來說，當前的藥品生產質量管理規范［21 CFR 211.194(a)] 要求，用于評估藥品是否符合已建立規范的測試方法必須滿足準確度和可靠性的合適標準^⑦。

1. FDA網站：fda.gov/cder/guidance/cGMPs/equipmenthtm。

2. 藥品評估與研究中心（CDER）和生物制品評估和研究中心（CBER)。

3. Guidance for industry Q2B: Validation of Analytical Procedures. Methodology. November 1996. ICH, FDA, CDER, CBER.

4. Taylor, John K. Quality Assurance of Chemical Measurements. Lewis Publishers imprint of CRC Press; 1987.

5. USP<1225>Validation of Compendial Methods.

6. The Swab Recovery Determination of CIP-100 in Solutions by TOC Analysis Using a Sievers TOC Analyzer, Steris Corporation Analytical Method; 1993. 7. 21 CFR 211.194(a) Laboratory Records.

7. 21 CFR 211.194(a) Laboratory Records.