多克隆抗體及抗體制備流程

      抗體，又名免疫球蛋白 (Ig)，是一種由 B 細胞產生的大型 Y 形糖蛋白，可在免疫防御中起主要作用。抗體與病原體的特定分子（即抗原）發生特異性結合。
    抗體以一個或者多個 Y 形單體存在，每個 Y 形單體由 4 條多肽鏈組成。每個 Y 形單體包含兩條相同的重鏈（H）和兩條相同的輕鏈（L），重鏈和輕鏈的序列和長度不同。Y 形單體的頂部包含可變區（V），也稱抗原結合片段（F(ab)）區。該區可與給定抗原上的表位特異性緊密結合。

   抗體的基本結構包含恒定區（C）和可結晶片段（Fc）區。這一區域對抗體的免疫應答功能非常重要。此外，將熒光染料和酶經共價鍵連接到抗體的 Fc 部位，可實現實驗的可視化。
Y形抗體通過彈性的鉸鏈區連接到中部。抗原結合發生在由免疫球蛋白重鏈（H）和輕鏈（L）組成的可變區（V）?？贵w的基本結構由恒定區（C）組成。根據多肽序列的微小差異，抗體的輕鏈都可分為 kappa (κ) 型或 lambda (λ) 型。重鏈結構決定了各個抗體的總類。

   哺乳動物體內的抗體分為 5 種同種型：IgG、IgM、IgA、IgD 和 IgE。各個同種型都有相應的結構。這些同種型因 Y 形結構的數量和重鏈種類而異。它們的生物學特性、功能區域以及結合不同抗原的能力有所不同。 

     由多種抗原決定簇刺激機體，相應地就產生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就稱為多克隆抗體，機體內所產生的抗體就是多克隆抗體。除了抗原決定簇的多樣性以外，同樣一種抗原決定簇，也可刺激機體產生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體。與單克隆抗體相比，大量多克隆抗體的生產相對快速且成本低廉。它們是非特異性的，因為它們能夠識別任何一種抗原上的多個表位。

（二）優勢和局限性

1.多克隆抗體的優勢

（1）可以幫助增加 WB 信號，因為抗體將與多個表位結合。

（2）由于識別多個表位，多克隆抗體可以在 IP/ChIP 檢測中提供更好的結果。

（3）更能容忍抗原的微小變化，例如多態性、糖基化異質性或輕微變性。

（4）當抗原的性質未知時很有用

（5）生產成本低，時間短

2.多克隆抗體的缺點

（1）更容易出現批次間的差異。

（2）多個表位使得檢查免疫原序列是否存在任何潛在的交叉反應變得很重要。

（三）應用

一種良好的多克隆抗血清含有抗某種抗原不同表位的多種抗體。由于多克隆抗血清通常包含抗某一抗原的不同表位的抗體，包括變性—抗性的表位，所以，在深固定的樣本中也會發揮效應，在石蠟包埋組織切片的染色中，多克隆抗體常選用。根據實驗的不同需要，多克隆抗體應用于相應抗原的標記。此外，在農業生產中，多克隆抗體被用于農藥殘留現場監測；在臨床應用中，多克隆抗體主要用于病原物的檢測、疾病的診斷及治療，如作為蛋白類免疫抑制劑用于移植反應和自身免疫病的治療。

三、單克隆抗體與多克隆抗體制備流程的比較

   經過特定抗原處理過的B淋巴細胞與骨髓瘤細胞通過細胞融合的方法得到雜交瘤細胞，經HAT培養基篩選、ELISA檢測效價后就得到陽性克隆株，最后進行細胞培養或將細胞注入到動物（一般為balb/c小鼠）腹腔中用腹水培養，收集上清/腹水純化后就能得到單克隆抗體。而制備多克隆抗體就沒有單克隆抗體繁瑣，只需將抗原（純度越高越好）直接注入到動物體內進行免疫，經過3至4次免疫，ELISA測其效價合格后，收集血液離心得到上清，純化后即能得到多克隆抗體。
    

     蘇州阿爾法生物供應單抗、雙抗、多抗、一抗、二抗等抗體蛋白及蛋白免疫學相關的生物試劑和儀器設備。