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            克隆抗體的特點和應用

            時間:2023/2/9閱讀:1372
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                單克隆抗體是由單一B細胞克隆產生的高度均一、僅針對某一特定抗原表位的抗體。通常采用雜交瘤技術來制備,雜交瘤(hybridoma)抗體技術是在細胞融合技術的基礎上,將具有分泌特異性抗體能力的致敏B細胞和具有無限繁殖能力的骨髓瘤細胞融合為B細胞雜交瘤。

                1975年分子生物學家G.J.F.克勒和C.米爾斯坦在自然雜交技術的基礎上,創建立雜交瘤技術,他們把可在體外培養和大量增殖的小鼠骨髓瘤細胞與經抗原免疫后的純系小鼠B細胞融合,成為雜交細胞系,既具有瘤細胞易于在體外無限增殖的特性,又具有抗體形成細胞的合成和分泌特異性抗體的特點。將這種雜交瘤作單個細胞培養,可形成單細胞系,即單克隆。利用培養或小鼠腹腔接種的方法,便能得到大量的、高濃度的、非常均一的抗體,其結構、氨基酸順序、特異性等都是一致的,而且在培養過程中,只要沒有變異,不同時間所分泌的抗體都能保持同樣的結構與機能。這種單克隆抗體是用其他方法所不能得到的。

            單克隆抗體的優勢和局限性

            1.單克隆抗體的優點

            (1)雜交瘤可以在體外存活并傳代,只要不發生細胞株的基因突變,就可以不斷地生產高特異性、高均一性的抗體。

            (2)可以用相對不純的抗原,獲得大量高度特異的、均一的抗體。

            (3)由于可能得到均一性抗體,所以適用于以標記抗體為特點的免疫學分析方法,如IRMA和ELISA等。

            (4)由于單克隆抗體的高特異性和單一生物學功能,可用于體內的放射免疫顯像和免疫導向治療。

            2.單克隆抗體的局限性

            (1)單克隆抗體固有的親和性和局限的生物活性限制了它的應用范圍。由于單克隆抗體不能進行沉淀和凝集反應,所以很多檢測方法不能用單克隆抗體完成。

            (2)單克隆抗體的反應強度不如多克隆抗體。

            (3)制備技術復雜,而且費時費工,所以單克隆抗體的價格也較高 。

            單克隆抗體的應用

            1.檢驗醫學診斷試劑

            作為檢驗醫學實驗室的診斷試劑,單克隆抗體以其特異性強、純度高、均一性好等優點,廣泛應用于酶聯免疫吸附試驗、放射免疫分析、免疫組化和流式細胞儀等技術。并且單克隆抗體的應用,很大程度上促進了商品化試劑盒的發展。

            2.蛋白質的提純

            單克隆抗體是親和層析中重要的配體。將單克隆抗體吸附在一個惰性的固相基質(如Speharose 2B、4B、6B等)上,并制備成層析柱。當樣品流經層析柱時,待分離的抗原可與固相的單克隆抗體發生特異性結合,其余成分不能與之結合。將層析柱充分洗脫后,改變洗脫液的離子強度或pH,欲分離的抗原與抗體解離,收集洗脫液便可得到欲純化的抗原。

            3. 腫瘤的導向治療和放射免疫顯像技術

            將針對某一腫瘤抗原的單克隆抗體與化療藥物或放療物質連接,利用單克隆抗體的導向作用,將藥物或放療物質攜帶至靶器官,直接殺傷靶細胞,稱為腫瘤導向治療。另外,將放射性標記物與單克隆抗體連接,注入患者體內可進行放射免疫顯像,協助腫瘤的診斷。單克隆抗體主要為鼠源性抗體,異種動物血清可引起人體過敏反應。因此,制備人-人單克隆抗體或人源化抗體更為重要,但此方面仍未取得明顯進展。
                  蘇州阿爾法生物多種單克隆抗體、多克隆抗體、一抗、二抗、抗體蛋白、熒光染料等生物試劑、抗體試劑應用于細胞學、免疫蛋白質組化、分子生物學。


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