實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 的結(jié)果分析--實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 常用名詞

校正染料 (ROX)

校正加樣誤差或孔與孔之間的誤差，提供一個(gè)穩(wěn)定的基線，極大地改進(jìn)定量的精確 度，提高重復(fù)管之間的數(shù)據(jù)重現(xiàn)性。

注意：不同的儀器對(duì) ROX 的需求不同。

基線

PCR 的最初幾個(gè)循環(huán)，在 此基線上熒光信號(hào)幾乎沒有變化。

閾值

可以相信的最小熒光值。

CT 值

擴(kuò)增曲線與閾值交點(diǎn)的橫坐標(biāo)。

二、結(jié)果有效性判斷

融解曲線單峰 ( 染料法 )

擴(kuò)增曲線指數(shù)擴(kuò)增區(qū)域，復(fù)孔間 CT 值 STD<0.2

閾值設(shè)置合理

閾值位于指數(shù)增長(zhǎng)期：儀器會(huì)自動(dòng)計(jì)算閾值，但并非所有情況下儀器計(jì)算結(jié)果都是 合理的，必要時(shí)進(jìn)行手動(dòng)調(diào)整。

NTC 確認(rèn)無氣溶膠污染或可以忽略

NTC = No Template Control (qPCR 反應(yīng)，模板以水代替 )；

若 ΔCT=NTC (CT 值 ) - 目的基因 (CT 值 ) ≥3 或 ≥5，可認(rèn)為體系中氣溶膠污染不會(huì) 影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

NRT 確認(rèn)無基因組殘留或可以忽略

NRT=No RT Control ( 逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng)中，除逆轉(zhuǎn)錄酶組分，其余組分正常添加 )；

若 ΔCT=NRT (CT 值 ) - 目的基因 (CT 值 ) ≥3 或 ≥5，可認(rèn)為體系中基因組殘留不會(huì) 影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

待測(cè) CT 值于線性范圍內(nèi)

擴(kuò)增效率符合近似計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)

PCR 擴(kuò)增效率 (e) 介于 90%-120% 之間

安培生物致力成為推動(dòng)生命科學(xué)進(jìn)步值得信賴的合作者

深圳/湛江安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術(shù)實(shí)力、先進(jìn)的經(jīng)營(yíng)管理水平和完善的市場(chǎng)銷售體系的生物高科技企業(yè)。總部設(shè)在廣東，服務(wù)面向全國(guó)。安培生物集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司，旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供較好的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號(hào)傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線，在各個(gè)領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供較高的水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品，安培生物致力于為廣大的科研機(jī)構(gòu)、高等院校等客戶提供各種產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。可以在第一時(shí)間為用戶提供比較先進(jìn)的專業(yè)資訊和完備的產(chǎn)品和物流服務(wù)。 專業(yè)的技術(shù)力量使得我們能夠?yàn)閺V大用戶提供強(qiáng)大的技術(shù)支持，深厚的人脈資源使得我們?cè)谌珖?guó)主要城市擁有眾多的合作伙伴，安培生物非常榮幸能將世界上先進(jìn)的高科技產(chǎn)品推薦給國(guó)內(nèi)從事生物學(xué)領(lǐng)域科研的老師和同仁。作為專業(yè)性的產(chǎn)品供應(yīng)商，公司出資存?zhèn)淞舜罅楷F(xiàn)貨，配合優(yōu)秀的銷售隊(duì)伍以及專業(yè)的技術(shù)支持，隨時(shí)為客戶提供服務(wù)