簡介 　

胃癌是全球腫瘤相關(guān)死亡排名靠前的癌癥。胃癌有強(qiáng)大的轉(zhuǎn)移能力，常見的轉(zhuǎn)移位置為腹膜、淋巴結(jié)、肝、肺和骨骼。在轉(zhuǎn)移的過程中，上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)移是腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生轉(zhuǎn)移表型的重要一步。上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)移的第一步是表皮細(xì)胞之間聯(lián)系斷開，比如緊密連接(TJs)、粘附連接、橋粒和間隙連接。TJs包含內(nèi)源性膜蛋白，例如CLDN和occludin和細(xì)胞質(zhì)蛋白Zonula occludens 1(ZO1)，ZO2，ZO3，這些都是跨膜蛋白。他們起到鏈接細(xì)胞骨架蛋白和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的作用。總的來說CLDNs在細(xì)胞框架和細(xì)胞-細(xì)胞粘附和轉(zhuǎn)移中起到重要作用。

參考文獻(xiàn)1：細(xì)胞間緊密連接蛋白

CLDN18.2限制性表達(dá)于分化成熟的胃粘膜上皮細(xì)胞以及多種腫瘤細(xì)胞表面，在胃正常組織中維持胃粘膜的屏障功能，通過細(xì)胞旁途徑防止胃酸中的H+泄露。 在胃上皮組織惡性轉(zhuǎn)化時(shí)，細(xì)胞極性的擾動(dòng)導(dǎo)致CLDN18.2表位的細(xì)胞表面暴露以及在特定腫瘤組織中高度、選擇性和穩(wěn)定表達(dá)。CLDN18.2在人、黑猩猩、獼猴、小鼠、大鼠、狗、兔等動(dòng)物物種間的同源性高達(dá)84%，這為藥物開發(fā)前期的安全性和有效性試驗(yàn)提供了極大便利。

參考文獻(xiàn)2：細(xì)胞膜Claudin示意圖 

CLDN18.2 分子特征

CLDN18.2基因位于人染色體3q22位點(diǎn)，由261個(gè)氨基酸組成，為四次跨膜結(jié)構(gòu)。相對分子質(zhì)量27700，其氨基和羧基端均位于細(xì)胞膜內(nèi)側(cè)。CLDN18.2有2個(gè)胞外環(huán)結(jié)構(gòu)域，胞外環(huán)是由53個(gè)氨基酸構(gòu)成的4個(gè)反向折疊的β片層組成，其中β3和β4之間存在2個(gè)高度保守的半胱氨酸，他們之間形成的二硫鍵有利于分子結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定。胞外環(huán)2由31個(gè)氨基酸組成。

CLDN18.2 調(diào)控與表達(dá)

有研究表明 PMA(十四烷酰佛波醇乙酸酯)通過激活PKC(蛋白激酶C)來上調(diào)CLDN18.2的表達(dá)。使用PKC的抑制劑GF109203X預(yù)處理胃癌細(xì)胞系，PMA不能使CLDN18.2表達(dá)上調(diào)，說明PKC與CLDN18.2的表達(dá)有關(guān)。

CLDN18.2啟動(dòng)子區(qū)域轉(zhuǎn)錄激活因子AP1結(jié)合位點(diǎn)參與了PMA上調(diào)CLDN18.2的過程。

CLDN18.2啟動(dòng)子區(qū)域的存在CpG島，正常肺組織、外周血單核細(xì)胞等不表達(dá)CLDN18.2的組織或細(xì)胞中，CLDN18.2啟動(dòng)子區(qū)域的CpG甲基化，在正常的胃組織細(xì)胞，肺癌細(xì)胞等腫瘤細(xì)胞系中CpG島的甲基化程度較低。

CLDN18.2 相關(guān)腫瘤疾及藥物

研究者最初在胃癌組織中發(fā)現(xiàn)CLDN18.2一致和穩(wěn)定的表達(dá)，后續(xù)在乳腺癌、直腸癌、肝癌、頭部和頸部癌癥、支氣管癌癥、非小細(xì)胞性肺癌尤其是消化系統(tǒng)的食管癌中均有表達(dá)。

有研究將來自于胃印戒細(xì)胞癌的105個(gè)樣本進(jìn)行免疫組化染色發(fā)現(xiàn)95.2%的樣本呈現(xiàn)陽性。中等至強(qiáng)度的CLDN18.2的表達(dá)大約占64.8%。其中有21%的樣本90%以上的癌細(xì)胞呈現(xiàn)陽性。

隨著CLDN18.2陽性的腫瘤數(shù)量增加，研究人員發(fā)現(xiàn)這些腫瘤可能同時(shí)是甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子陰性腺瘤，這說明CLDN18.2有可能是判斷甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子陰性的指標(biāo)。

CLDN18.2不僅在原始腫瘤表達(dá)，也在轉(zhuǎn)移性腫瘤高表達(dá)并且與惡性腫瘤的增殖和趨化有關(guān)。在一項(xiàng)胰腺癌轉(zhuǎn)移患者的研究中，人們發(fā)現(xiàn)在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組織、肝癌轉(zhuǎn)移組織、肺轉(zhuǎn)移性組織中CLDN18.2的陽性率分別為70%、66%、59%。

轉(zhuǎn)移性淋巴結(jié)中的CLDN18.2表達(dá)明顯高于原發(fā)淋巴結(jié)腫瘤，且與淋巴結(jié)CLDN18.2陽性患者的預(yù)后有關(guān)。CLDN18.2陽性與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移具體機(jī)制尚不清楚，但是可能與CLDN18.2改變惡性腫瘤細(xì)胞間緊密連接的結(jié)構(gòu)和功能有關(guān)。

CLDN18.2陽性的腫瘤治療與進(jìn)展： 靶向CLDN18.2的陽性腫瘤的治療方案包括單抗、雙特異性抗體、CAR-T、ADC藥物等。截止2022年1月底，國內(nèi)有15項(xiàng)臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行中，國外有28個(gè)。這些臨床試驗(yàn)主要靶向?qū)嶓w瘤包括晚期不可切除胃癌、轉(zhuǎn)移性食管癌、胰腺癌等。共有22個(gè)用單抗，3個(gè)用雙特異性抗體，9個(gè)用的CAR-T治療，9個(gè)用的ADC藥物治療。

單抗：

1.Claudiximab是由德國Ganymed開發(fā)的人IgG1恒定區(qū)鼠嵌合單抗，可特異性、高親和力地識(shí)別CLDN18.2蛋白細(xì)胞膜外第一個(gè)細(xì)胞外域(ECD1)且不與其他家族成員結(jié)合。多項(xiàng)臨床試驗(yàn)表明，Claudiximab能夠誘導(dǎo)體外培養(yǎng)的陽性胰腺細(xì)胞凋亡，且殺傷能力與細(xì)胞表面蛋白表達(dá)水平呈現(xiàn)正相關(guān)。聯(lián)合使用化療藥物吉西他濱可上調(diào)人胰腺癌細(xì)胞蛋白表達(dá)并增強(qiáng)CLDN18.2介導(dǎo)的ADCC作用。

2.TST1001是新的人源化的IgG1抗體 與Claudiximab相比，TST1001缺少巖藻糖基化，與FcγRⅢa結(jié)合親和力更高，因此能夠誘導(dǎo)更強(qiáng)烈的ADCC作用。同時(shí)，TST1001比Claudiximab有更強(qiáng)的CDC和ADCP的作用。臨床Ⅰ期劑量遞增試驗(yàn)中，在經(jīng)化療、PD-1免疫治療、VEGF抑制劑等治療的晚期胃癌患者中，TST1001治療6周癥狀部分緩解。其中一位病人的腫瘤標(biāo)志物有快速和明顯的降低。在TST1001聯(lián)合治療試驗(yàn)中，同樣在6周緩解部分癥狀。

雙抗：

1.AMG-910 是半衰期延長的HLE BiTE(Bispecifc T-cell Engager) 能夠靶向CD3陽性的T細(xì)胞和CLDN18.2陽性的腫瘤細(xì)胞。關(guān)于AMG-910第一個(gè)臨床終點(diǎn)包括治療的副作用，第二個(gè)臨床終點(diǎn)包括AMG-910的藥代動(dòng)力學(xué)、客觀反應(yīng)、反應(yīng)持續(xù)時(shí)間、進(jìn)展時(shí)間、6個(gè)月和1年無進(jìn)展生存期以及1年和2年的總生存率。

2.Q-1802 是靶向PD-L1和CLDN18.2的雙特異性抗體，可介導(dǎo)ADCC作用。另一方面，PD-L1抗體阻斷了PD-1/PD-L1 的相互識(shí)別啟動(dòng)免疫反應(yīng)。目前該藥物的臨床Ⅰ期試驗(yàn)正在進(jìn)行中。

除了以上單抗和雙抗，采用CAR-T的CT041、LY011、LCAR-C18S，以ADC為基礎(chǔ)的CMG901、SYSA-1801、RC118等藥物的臨床試驗(yàn)均在進(jìn)行中。