人血清白蛋白（人血漿白蛋白）存在于人體血漿中，占血清蛋白質(zhì)的55-63%，是血清中少數(shù)不含糖的蛋白質(zhì)之一，分子量67.5kD，由585個(gè)氨基酸殘基組成的單鏈多肽，分子中含17個(gè)二硫鍵，等電點(diǎn)為4.9。具有增加血容量和維持血漿膠體滲透壓、運(yùn)輸和解毒以及營(yíng)養(yǎng)共給的功能。

EPO（重組人促紅細(xì)胞生成素）由腎皮質(zhì)腎小管周?chē)g質(zhì)細(xì)胞和肝臟分泌的一種激素樣物質(zhì)，能夠促進(jìn)紅細(xì)胞生成。其為酸性糖蛋白，疏水性強(qiáng)，含有165個(gè)氨基酸，相對(duì)分子質(zhì)量約為34 kD（30-39kD），其中糖鏈約占39%，兩個(gè)鏈內(nèi)二硫鍵，等電點(diǎn)為3.75-4.15。醫(yī)療用途：增加紅血球的數(shù)目，用于貧血、組織斷離等治療；體育用途：增加訓(xùn)練耐力和訓(xùn)練負(fù)荷，屬于國(guó)際奧委會(huì)規(guī)定的違禁藥物。

本文采用離子交換液相色譜方法和空間排阻色譜法對(duì)人血白蛋白和EPO分離。各種不同分離方法色譜條件見(jiàn)表2-18，各分離模式下柱溫均為30 ℃，進(jìn)樣量10 µL，檢測(cè)波長(zhǎng)280 nm。分析圖譜見(jiàn)圖2-25到2-26

（1）體積排阻色譜條件：色譜柱：Mab Pac SEC-1，5 µm，4.0×300 mm， P/N：074696流動(dòng)相：1.5 mmol/L KH2PO4-3.2 mmol/L Na2HPO4-400 mmol/L NaCl，pH=7.3混合溶液流速：0.20 mL/min（2）離子交換色譜條件：色譜柱：MAb Pac WAX-10，10 µm，4.0×250 mm， P/N：054999流動(dòng)相：A：10mmol/L Tris緩沖液pH=8.2； B：10mmol/L Tris緩沖液，1.0mol/L的NaCl，pH=8.2；流速：1.0 mL/min

梯度條件見(jiàn)表2-18；采用離子色譜法測(cè)定樣品，保留時(shí)間和峰面積的重現(xiàn)性非常好，含量接近標(biāo)示量。同時(shí)人血白蛋白和EPO分別在0.1-10 mg/mL和0.05-1.62 mg/mL范圍內(nèi)，線性關(guān)系較好，見(jiàn)附錄結(jié)果。因此采用陰離子交換色譜柱ProPac WAX-10在色譜條件下能夠?qū)θ搜椎鞍缀虴PO進(jìn)行很好分離分析。參照藥典的方法，采用Mab Pac SEC-1色譜柱對(duì)EPO、人白和樣品溶液進(jìn)行分析，結(jié)果表明樣品溶液中，低濃度的EPO峰和高濃度的人白色譜峰重疊在一起，無(wú)法進(jìn)行很好分離，主要原因可能實(shí)驗(yàn)室色譜柱的體積排阻限比較寬（10-1000kD），建議采用體積排阻限符合藥典的色譜柱，結(jié)果可能會(huì)比較好。