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            上海達為科生物科技有限公司
                                                                        
            
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            3-4周齡雌性大鼠卵巢顆粒細胞的原代培養(yǎng)
            
						
            
							時間：2024/7/3閱讀：1247
							
            
							
				
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            1. 3-4周齡雌性SD大鼠，皮下注射孕馬血清促性腺激素（Pregnant Mare Serum Gonadotropin，PMSG） 60IU，48h后頸椎脫臼處死。
            2. 大鼠浸入75%乙醇浸泡5-10分鐘，轉(zhuǎn)移到通風柜中的解剖盤中。
            3. 在距離大鼠脊柱1cm、肋下1cm的交叉位置剪開皮膚、肌肉，可見白色的脂肪組織，拉出脂肪組織，可見到粉紅色的卵巢，摘除卵巢。
            4. 取卵巢放入預冷的含雙抗的緩沖液中，用緩沖液清洗卵巢三次,去除周圍組織及表面包膜。
            5. 在解剖顯微鏡下用1mL的注射器刺破卵泡，釋放顆粒細胞。
            6. 將懸液通過70μm篩網(wǎng)過濾至50ml離心管中，之后200g，離心7min。
            7. 計數(shù)，種植到24孔板和大皿中。
            8. FSHR表達鑒定顆粒細胞。

            
							
							
							
						
            
					
            
				
            
			
            
		
            
		
		
		
		 



  
    
    				
			

		
    
    
    
    
    
    
    
    
    
    

    

     
     
     
	 




	 
	
	
	

            
	
            
		
            
			
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