活力染色技術(shù)2022/5/19

一、實(shí)驗(yàn)原理各種細(xì)胞操作，包括傳代、凍存和原代組織的分離，均能導(dǎo)致細(xì)胞死亡。為了確定群體細(xì)胞中的存活細(xì)胞數(shù)，可采用臺(tái)盼藍(lán)染料排斥實(shí)驗(yàn)（Phillips1973)。正常的健康細(xì)胞能排斥染料，但細(xì)胞膜完整...

細(xì)胞轉(zhuǎn)染技術(shù)2022/5/19

一、細(xì)胞轉(zhuǎn)染細(xì)胞轉(zhuǎn)染是指將外源分子如DNA，RNA等導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)。常規(guī)轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染兩大類(lèi)。本實(shí)驗(yàn)室主要是質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、miRcroRNA轉(zhuǎn)染、慢病毒轉(zhuǎn)染、藥物轉(zhuǎn)染、多肽轉(zhuǎn)染等。二...

流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期2022/5/19

流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期1。實(shí)驗(yàn)原理用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期，通常用碘化丙啶（propidiumiodide，PI）染細(xì)胞核。PI在一定波長(zhǎng)的光下發(fā)出熒光，其強(qiáng)度與DNA含量成正比。通過(guò)流式細(xì)胞儀分析各...

一般慢性炎癥的基本病理變化2022/5/14

1、炎癥灶內(nèi)主要是巨噬細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞浸潤(rùn)。單核吞噬細(xì)胞的浸潤(rùn)對(duì)慢性炎癥十分重要。單核細(xì)胞從血管游出后轉(zhuǎn)化為巨噬細(xì)胞。巨噬細(xì)胞還可被激活。在炎癥灶局部巨噬細(xì)胞的積聚有三方面的原因：①由于從炎癥灶...

激光掃描共聚焦顯微鏡操作步驟及注意事項(xiàng)2022/5/14

激光掃描共聚焦顯微鏡可測(cè)定的樣品種類(lèi)很多．包括生物材料、組織(切片)、細(xì)胞(亞細(xì)胞)結(jié)構(gòu)等。樣品中熒光的來(lái)源主要有如下幾種：自發(fā)熒光(autofluorescence)、熒光染色、免疫熒光、熒光蛋白、...

人非小細(xì)胞肺癌裸鼠原位種植轉(zhuǎn)移模型的建立實(shí)驗(yàn)2022/5/14

人非小細(xì)胞肺癌裸鼠原位種植轉(zhuǎn)移模型的建立：（1）探討肺癌遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和阻斷其遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的研究；（2）模擬晚期非小細(xì)胞肺癌轉(zhuǎn)移的自然發(fā)生過(guò)程；（3）在活體動(dòng)物的完整器官內(nèi)評(píng)估瘤細(xì)胞播散和腫瘤的生長(zhǎng)。實(shí)驗(yàn)方法原...

人胃癌高轉(zhuǎn)移模型2022/5/14

人胃癌高轉(zhuǎn)移模型的建立可以：（1）研究腫瘤轉(zhuǎn)移機(jī)制；（2）研究腫瘤防治；（3）為腫瘤轉(zhuǎn)移研究提供更為理想的動(dòng)物模型。腫瘤組織塊原位移植法實(shí)驗(yàn)方法原理用人胃癌組織塊SGC-7901原位移植于SCID小鼠...

人胰腺癌裸小鼠模型2022/5/14

人胰腺癌裸小鼠模型實(shí)驗(yàn)方法原理將人胰腺癌細(xì)胞株8988接種于裸鼠腋窩處皮下，每周測(cè)量腫瘤大小，第42d處死小鼠。腫瘤組織及相關(guān)臟器送病理及電鏡檢查，放射免疫法檢測(cè)相關(guān)抗原。皮下腫瘤組織細(xì)胞及細(xì)胞株培養(yǎng)...

多重 PCR 擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)2022/5/7

試劑、試劑盒Taq聚合酶溶于水的DNA引物儀器、耗材熱循環(huán)儀實(shí)驗(yàn)步驟一、材料1.酶和酶緩沖液Taq聚合酶許多Taq聚合酶都可以用；作者發(fā)現(xiàn)Roche公司的Taq聚合酶可以滿(mǎn)足大多數(shù)需要.如果需要提高P...

免疫熒光實(shí)驗(yàn)方法中需要注意的環(huán)節(jié)2022/5/7

免疫熒光方法中的重要環(huán)節(jié):1、冰凍切片制備：建議用新鮮組織，否則組織細(xì)胞內(nèi)部結(jié)構(gòu)破壞，易使抗原彌散。選用干凈鋒利的刀片、組織一定要冷凍適度等，防止裂片和脫片嚴(yán)重。2、組織切片固定：切好片風(fēng)干后立即用冰...

組織切片的免疫熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)2022/5/7

免疫熒光標(biāo)記技術(shù)（immunofluorescencetechnique）是將已知的抗體或抗原分子標(biāo)記上熒光素，當(dāng)與其相對(duì)應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時(shí)，在形成的復(fù)合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就...

腫瘤細(xì)胞體外傳代培養(yǎng)及保種2022/5/7

一.細(xì)胞復(fù)蘇與培養(yǎng)將液氮或-80℃保存的腫瘤細(xì)胞于37℃水浴，快速溶化，用8.0ml培養(yǎng)基混勻已融化的腫瘤細(xì)胞懸液，于1500轉(zhuǎn)/分，離心3分鐘。棄上清，再吸取8.0ml培養(yǎng)基質(zhì)混勻細(xì)胞沉淀，再150...

懸浮細(xì)胞的免疫熒光標(biāo)記實(shí)驗(yàn)2022/5/7

免疫熒光標(biāo)記技術(shù)（immunofluorescencetechnique）是將已知的抗體或抗原分子標(biāo)記上熒光素，當(dāng)與其相對(duì)應(yīng)的抗原或抗體起反應(yīng)時(shí)，在形成的復(fù)合物上就帶有一定量的熒光素，在熒光顯微鏡下就...

成年小鼠的灌流實(shí)驗(yàn)2022/4/30

進(jìn)行實(shí)驗(yàn)動(dòng)物灌流是獲得良好的形態(tài)學(xué)觀察結(jié)果以及保存腦、腎、心臟和其他許多器官所必需的。對(duì)于未經(jīng)訓(xùn)練的實(shí)驗(yàn)人員，初次進(jìn)行灌流可能會(huì)失敗，故建議首先用一些對(duì)照實(shí)驗(yàn)動(dòng)物練習(xí)，以熟悉此過(guò)程。基本方案實(shí)驗(yàn)材料小...

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的取血標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)2022/4/30

名稱(chēng)：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的取血關(guān)鍵詞：動(dòng)物,取血,方法目的：規(guī)范實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(家兔、狗，豚鼠)取血的方法和途徑,主體內(nèi)容：（一）家兔1．耳緣靜脈取血法選好耳緣靜脈，拔去被毛，用二甲苯或酒精涂擦局部，小血管夾夾緊耳根...